一群由穷凶极恶的死刑犯组成的特种小队，小丑女、死亡射手、回旋镖队长、黑蜘蛛、冰霜杀手、鲨鱼王等人，受制于植入脑后的纳米炸药，他们被迫受命闯入阿卡姆疯人院，去取得一份被谜语人窃走的秘密名单。小队成员互相猜忌，各怀心思，哥谭的黑暗骑士又会不会任由小队完成任务呢？囚禁于阿卡姆的小丑和其他恶人又会对任务造成怎样的影响？

正义联盟将面临一群超级恶棍，他们的力量甚至可以与世界上最伟大的超级英雄在正义联盟与致命五人组（2019年上映的DC宇宙原创电影）中抗衡。

影片主线承接《蝙蝠侠之子》，故事发生在《正义联盟：亚特兰蒂斯王座》之后，被刺客联盟养大的达米安（斯图尔特·艾伦 配音）执法手段与蝙蝠侠（杰森·奥玛拉 配音）完全相反，甚至是截然不同。达米安有些迷茫自己究竟想要成为什么样的人，而此时的蝙蝠侠并没有完全领略做父亲的奥秘，他对待达米安也展现出常人的一面，除了教训就只剩下束手无策了。这时猫头鹰法庭的人给达米安提供了另一种选择，同时他们认为蝙蝠侠对他们来说是个麻烦，他们希望能解决蝙蝠侠……